22Rv1   人前列腺癌細(xì)胞

Cat NO.: CL-0004

General Information:

Organism: Homo sapiens, human

Tissue: prostate

Culture Properties: adherent

Morphology: epithelial

Culture Method:

Complete Growth Medium: RPMI-1640(Gibco31800-022)+10%FBS+ Penicillin/Streptomycin

Subculturing: Volumes are given for a 25cm2 flask. Increase or decrease the amount of dissociation medium needed proportionally for culture vessels of other sizes.

1.Remove and discard culture medium.

2.Briefly rinse the cell layer with 0.25%(w/v) Trypsin-EDTA solution to remove all traces of serum that contains trypsin inhibitor.

3.Add 1.0 to 2.0mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed. Discard Trypsin-EDTA solution.

4.Add 6.0 to 8.0mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.

5.Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.

6.Incubate cultures at 37°C, 5% CO2.

Subc*tion Ratio: A subc*tion ratio of 1:3 to 1:6 is recommended

Cryopreservation: Freeze medium: Complete growth medium supplemented with 10% (v/v) DMSO

Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

注意事項(xiàng)：

1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)絡(luò)。

2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)4~6小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)絡(luò)，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4.靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留6~8mL維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì)胞匯合度80%左右時(shí)正常傳代。

5.請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6.建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和Procell技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)絡(luò)，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細(xì)胞只可用于科研。

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