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全面解讀：抗體選擇指南，值得珍藏
點(diǎn)擊次數(shù)：748 更新時(shí)間：2024-08-19
 


避免同種系物種的一抗選擇

- 避免同種系干擾：在進(jìn)行小鼠樣本檢測(cè)時(shí)，應(yīng)避免使用小鼠或大鼠來源的一抗。

- 原因：防止二抗與樣本中的內(nèi)源性免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致背景信號(hào)過高。

稀有樣本種屬的抗體選擇策略

- 免疫原序列查詢：對(duì)于市面上難以找到驗(yàn)證過的抗體，如豬、牛等，可以通過查詢抗體的免疫原序列，并與待測(cè)蛋白進(jìn)行同源性分析。

- 同源性標(biāo)準(zhǔn)：若同源性超過90%，可以嘗試使用，但需注意，這種情況下，廠家通常不提供質(zhì)保。

- 同源性分析方法：詳見下方視頻教程。

- 商業(yè)機(jī)密問題：對(duì)于某些品牌，如CST，免疫原序列可能屬于商業(yè)機(jī)密。此時(shí)，可以提供自己的蛋白序列，請(qǐng)求廠家專家?guī)椭治鐾葱圆⒔o出使用建議。


實(shí)驗(yàn)方法確認(rèn)


確認(rèn)抗體適用性

- 實(shí)驗(yàn)方法標(biāo)注：檢查抗體說明書上的實(shí)驗(yàn)方法（application），確保包含您計(jì)劃進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)類型。

- WB實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)便性：如果僅進(jìn)行Western Blot（WB），選擇在說明書中標(biāo)注WB的抗體即可。

- 多實(shí)驗(yàn)方法選擇：建議選擇實(shí)驗(yàn)方法多樣的抗體，以便未來進(jìn)行其他類型實(shí)驗(yàn)時(shí)無需重復(fù)購(gòu)買。

- 免疫組化（IHC）注意事項(xiàng)：若進(jìn)行IHC，需確認(rèn)樣本類型（如石蠟切片、冰凍切片或細(xì)胞）是否已由廠家驗(yàn)證。未經(jīng)驗(yàn)證的樣本類型通常不提供質(zhì)保。