哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家——ELISA顯色淡原因的這些錯(cuò)誤步驟你中招了嗎

昨天下午，有位客戶致電我司業(yè)務(wù)員咨詢ELISA顯色淡的原因及解決方法。問(wèn)題解決之后，我司業(yè)務(wù)員將具體內(nèi)容整理出，在這里分享給大家。這些個(gè)造成ELISA顯色淡原因的這些錯(cuò)誤步驟你中招了嗎？

● 可能原因

   1.試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng)，溫度太高；

   2.試劑盒未充分平衡；

   3.培養(yǎng)箱溫度不足37℃；

   4.保溫時(shí)間不足；

   5.洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加；

   6.移液器吸液量不足，吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔；

   7.蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題；

   8.底物作用時(shí)間不足。

● 解決方法

   1.盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫；

   2.試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)；

   3.注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開(kāi)啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意；

   4.校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)；

   5.按說(shuō)明書(shū)要求保留洗滌時(shí)間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)；

   6.校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密，吸嘴內(nèi)壁要清潔，一次性使用；

   7.使用新鮮合格的蒸餾水；

   8.準(zhǔn)確定時(shí)。

另外還有一個(gè)相關(guān)重點(diǎn)問(wèn)題值得討論，上海哈靈實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員特別說(shuō)明：①顯色一定要控制時(shí)間，根據(jù)試劑盒說(shuō)明操作即可。一般來(lái)說(shuō)，顯色時(shí)間過(guò)短，結(jié)果偏低；②顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，空白增高或者非特異性顯色增加。