主要用途 細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取懸液樣品(動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等)丙酮酸激酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。 技術(shù)背景 丙酮酸激酶(Pyruvate Kinase;PK)是細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)酶,催化細(xì)胞糖酵解的后反應(yīng):將磷酸烯醇丙酮酸(phosphoenol pyruvate;PEP)轉(zhuǎn)化成丙酮酸(pyruvate),同時(shí)產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶由4個(gè)相同的亞單位構(gòu)成,在肝組織、肌肉組織和紅細(xì)胞中有不同類型的異構(gòu)體。果糖-2,6-二磷酸(Fructose-2,6-bisphosphate;F2,6BP)是該酶的激活劑,而ATP、蛋氨酸(alanine)、乙酰輔酶A (Acetyl-CoA)是該酶的抑制劑。丙酮酸激酶的活性檢測(cè)用來評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織,包括紅細(xì)胞的損害狀況?;诹姿嵯┐急徂D(zhuǎn)化成丙酮酸后,通過乳酸脫氫酶系統(tǒng),測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD)的峰值變化(340nm 波長),來定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:
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