主要用途
細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌菌株裂解懸液和膜蛋白樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、發(fā)酵分析等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。
技術(shù)背景
琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase;SDH;EC 1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylic acid cycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線粒體內(nèi)膜,參與細(xì)胞呼吸鏈。細(xì)菌琥珀酸脫氫酶,又稱為SdhCDAB,為膜結(jié)合性蛋白,分為周邊(peripheral)和跨膜(transmembrane)部分,其中周邊親水部分由SdhA和SdhB亞體組成:SdhA亞體含有黃素蛋白(flavoprotein),是琥珀酸的活性部位;SdhB含有鐵硫蛋白(iron-sulfur protein),進(jìn)行電子傳遞;跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亞體組成:SdhC含有亞鐵血紅素-B(Heme-B),SdhD含有泛醌(ubiquinone)結(jié)合部位(Q部位)。其作用在于參與三羧酸循環(huán)(TCA cycle)和呼吸鏈活動(dòng)。琥珀酸脫氫酶催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過(guò)黃素腺嘌呤二核苷酸(Flavin Adenine Dinucleotide;FAD)傳遞電子。基于琥珀酸脫氫酶的反應(yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenol sodium;DCIP),接受來(lái)自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(Reduced flavin Adenine Dinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長(zhǎng))的變化,來(lái)測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為: |