主要用途 細(xì)胞β-半乳糖苷酶原位染色試劑是一種旨在以X-Gal為底物,通過細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的外源性細(xì)菌β-半乳糖苷酶的催化所生成的深藍(lán)色的沉積產(chǎn)物,從而在光學(xué)顯微鏡下觀察到藍(lán)色表達(dá)的細(xì)胞,藉此建立一種簡單的目測顏色來識(shí)別報(bào)告基因陽性細(xì)胞的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。廣泛應(yīng)用于基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和其它分子生物學(xué)研究。其適用于轉(zhuǎn)基因后的人體和動(dòng)物細(xì)胞。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,參數(shù)優(yōu)化,著色敏感,堪稱上同類產(chǎn)品佳。 技術(shù)背景 大腸桿菌的標(biāo)志基因Lac Z編碼β-半乳糖苷酶(?-galactosidase;?-gal),在其催化作用下,半乳糖可從乳糖的水解作用中得到。β-半乳糖苷酶非常穩(wěn)定,對(duì)蛋白水解降解作用抗性強(qiáng),且容易測試。因此β-半乳糖苷酶成為目前常用的報(bào)告基因,以評(píng)價(jià)載體轉(zhuǎn)染的效果。X-Gal (5-bromo-4-chloro-3-indoyl- ?-D-Galacto pyranoside)是生物化學(xué)中常用的一種有機(jī)物,β-半乳糖苷酶可以將X-Gal轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物,由此用它作為生色底物,來建立一種簡單的目測顏色來確定細(xì)胞β-半乳糖苷酶的活性,從而通過光學(xué)顯微鏡鑒別轉(zhuǎn)染細(xì)胞報(bào)告基因的存在與否和強(qiáng)弱表現(xiàn)。
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