主要用途 血液脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑是一種旨在通過脯氨酸肽酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物二肽X-Proline水解后釋放的脯氨酸,與茚三酮反應(yīng)后,產(chǎn)生的吸光值變化,即采用比色法來測定血液樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物或人體血液樣品(血清、血漿、紅細(xì)胞等)脯氨酸肽酶(PLD)的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。 技術(shù)背景 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在著兩種肽鍵(peptide bond)形式:氫原子肽鍵和亞氨肽鍵(imidopeptide bond)。后者為脯氨酸或羥脯氨酸的雜環(huán)氮原子(heterocyclic nitrogen atom)肽鍵。超過25%脯氨酸和羥脯氨酸構(gòu)成的膠原蛋白(占人體30%蛋白總量)和明膠蛋白的肽鍵是雜環(huán)氮原子肽鍵。它們是結(jié)締組織的主要構(gòu)架。脯氨酸肽酶(prolidase;PLD;EC3.4.13.9),又稱為氨酰脯氨酸水解酶(aminoacyl-L-proline hydrolase),是一種亞氨二肽酶(imidodipeptidase),催化含有二肽羧基末端(C-terminal)的脯氨酸(proline)或羥脯氨酸(hydroxyproline)的水解反應(yīng),通過細(xì)胞間的蛋白降解,釋放脯氨酸,尤其是膠原蛋白或食源性蛋白的*降解具有重要作用。脯氨酸肽酶廣泛存在于人體組織中,在腎組織、腸粘膜和紅細(xì)胞中活性較高,而在肝組織、腦組織和血漿中較低。脯氨酸肽酶由2個同源亞單位構(gòu)成,有493個氨基酸,分子量為110kD。脯氨酸肽酶的活性檢測用來評價和診斷脯氨酸肽酶缺陷癥(prolidase deficiency;PD)狀況。基于二肽底物甘氨酰脯氨酸(Glycyl-L-Proline)在脯氨酸肽酶的催化下,釋放出脯氨酸,進而與茚三酮(ninhydrin)反應(yīng),而發(fā)生吸光值的增高(515nm波長),來定量測定脯氨酸肽酶的活性。脯氨酸肽酶反應(yīng)系統(tǒng)為:
|